Anticorpi secondari

Gli anticorpi secondari forniscono il rilevamento e l’amplificazione del segnale oltre ad estendere l’utilità di un anticorpo attraverso la coniugazione alle proteine e sono particolarmente adatti per l’immunomarcatura. Si legano agli anticorpi primari che sono direttamente legati all’antigene bersaglio. Gli anticorpi secondari trovano applicazione in diversi tipi di analisi come immunoistochimica, Western Blot, citometria a flusso ed ELISA. La selezione degli anticorpi secondari dipende interamente dalla classe degli anticorpi primari, dal tipo di etichetta e dall’ospite di origine. La maggior parte degli anticorpi primari appartiene alla classe IgG e sono generati in un insieme comune di specie ospite come pollo, coniglio, capra, topo, ecc. Quindi la nomenclatura corretta sarà IgG anti-capra, IgG anti-pollo, IgG anti-coniglio. Solitamente vengono utilizzati IgG anti-topo o anticorpi policlonali. Una conoscenza adeguata del test di rilevamento è quindi necessaria per identificare l’anticorpo secondario ottimale. cioè i test ELISA e Western blot possono essere eseguiti utilizzando il sistema reporter a fluorescenza, il sistema chemiluminescente e colorimetrico mentre la citometria a flusso e l’immunofluorescenza sono solitamente limitate alle etichette reporter fluorescenti. In tutte queste tecniche è necessario un anticorpo secondario coniugato.